实验介绍

原代细胞分离培养

将动物机体的各种组织从机体中取出，采用酶消化、机械法等途径使其分散成单细胞，并置于合适的培养基中培养，细胞得以存活、生长、繁殖。原代细胞相比较细胞系更能反应机体原有的特性，用于科学研究时更具有针对性和说服力。原代动物细胞分离培养包括上皮来源（表皮、乳腺上皮、子宫颈上皮、肝、胃上皮、胰腺、肾小管上皮、气管及支气管上皮、前列腺、口腔上皮、内皮等）细胞分离培养，结缔组织来源（成纤维、巨噬、脂肪组织、软骨、骨、破骨、血液等）细胞分离培养，神经组织来源及肌肉组织来源（骨骼肌、肌肉）细胞分离培养。

细胞分选

流式细胞分选：流式仪发射的一束单色光（通常是激光）照到流体力学聚焦的细胞流体上，若干个检测器瞄向流束和激光相交的点（激光在同一直线上（称作前散射(FSC)，和激光垂直的称为旁散射(SSC)），带有荧光标记的细胞通过光束时会按某种方式把光散射，同时所带有的荧光化合物被激发并发射出频率低于激发光的荧光，这些散射光和荧光的组合数据被检测器记录，经逻辑判断，给流束一个充电脉冲信号，带有细胞的小水滴则会带上正负不同的电荷，当液滴流经带有几千伏的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，实现细胞的分离收集。

免疫磁珠分选：磁珠分选是借助偶联在磁性微粒上抗体高特异性识别并标记目标细胞表面抗原，再让混有磁珠的细胞悬液通过磁场，结合了磁珠的细胞被吸附在磁场侧壁上，而未结合的细胞被除去，得到纯化的目标细胞，从而实现高效的分选与富集。

实验介绍

通过试剂转染或病毒感染的方式将目的基因导入细胞进行表达。若建立稳定细胞系，可根据导入基因载体携带的抗性标记，选用相应的药物对靶细胞进行筛选，得到稳定表达外源基因的细胞克隆，进而观察目的基因敲低及其表达对靶细胞发挥的生物学功能。

实验介绍

荧光素酶报告基因试验是检测转录因子与靶基因启动子区域是否结合及结合能力的重要方法。通过构建一个将靶启动子的特定片段插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因质粒，如pGL3-basic等，将要检测的转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染293细胞或其它相关的细胞系。如果此转录因子能够激活靶启动子，则荧光素酶基因就会表达，荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比，加入特定的荧光素酶底物，荧光素酶与底物反应，产生荧光，通过检测荧光的强度可以测定荧光素酶的活性，从而判断转录因子是否能与此靶基因启动子片段有作用。

实验介绍

细胞活力检测

可以通过测定线粒体酶活性或细胞膜完整性进行评估，并由总细胞中活细胞所占的百分比来衡量。

细胞增殖检测

用于动态跟踪一段时间内细胞的繁殖能力，一般通过活细胞计数法进行定点采集，或可通过检测细胞DNA的复制活性（如EdU法）对细胞增殖活力进行检测。

细胞周期检测

细胞周期的测定可以采用流式细胞仪测定法或BrdU渗入法。前者通过检测双链DNA荧光染料（如PI）与双链DNA结合后产生的荧光，反映双链DNA的含量，并通过分析DNA含量的分布情况，来进行细胞周期分析。后者利用BrdU（5-溴脱氧尿嘧啶核苷），一种胸腺嘧啶衍生物，可以作为细胞DNA复制的原料掺入复制的DNA中。若经过两个细胞周期，细胞中两条单链均含BrdU的DNA将占l/2，反映在染色体上应表现为一条单体浅染，如经历三个周期，则染色体中约一半为两条单体均浅染，另一半为一深一浅，计算分裂相中各期比例，就可算出细胞周期的值。

细胞凋亡检测

细胞凋亡的检测基于凋亡过程中细胞形态（荧光、共聚焦激光扫描及透射电子显微镜观察）、线粒体膜电位（Rhodamine123、DiOC6、JC-1、TMRM荧光染色法）及细胞膜完整性发生的变化（Annexin-Ⅴ-PI标记法），DNA断裂的产生（DNA Ladder/TUNEL法），以及凋亡相关蛋白（Caspase3、TFAR19）的活化与表达。

实验介绍

共培养体系主要用于诱导细胞向另一种细胞分化，诱导细胞自身分化，维持细胞功能和活力，对细胞增殖进行调控等，包括直接和间接共培养体系。

直接共培养体系

即将2种或2种以上的细胞同时或分别接种于同一孔中，不同种类的细胞之间直接接触，研究分泌的细胞因子或直接接触等相互作用方式对细胞的影响。

间接共培养体系

将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上，然后将这两种载体置于同一培养环境之中，使不同种类的细胞共用同一种培养体系而不直接接触，从而研究细胞分泌和代谢产生的物质对另一种细胞的影响。